Porc de poulet d'essai de sérum de Beta Agonist ELISA Kit For Milk Egg Urine 96 Wells/kit

Porc de poulet de sérum de Beta Agonist ELISA Kit For Milk Egg Urine 96 Wells/kit

 

1. Principe

Les β-agonistes examinent le kit est basés sur l'immunoessai concurrentiel d'enzymes pour la détection des β-agonistes dans l'échantillon. L'antigène de accouplement est enduit d'un préenduisage sur les rayures micro-bien. Les β-agonistes dans l'échantillon et les antigènes de accouplement enduits d'un préenduisage sur les rayures micro-bien concurrencent pour les anticorps d'anti-β-agonistes. Après que l'addition du conjugué d'enzymes, le substrat de TMB soit ajoutée pour la coloration. La valeur de la densité optique (OD) de l'échantillon a une corrélation négative avec les β-agonistes dans l'échantillon. Cette valeur est comparée à la courbe standard et les résidus de β-agonistes est plus tard obtenus.

 

2. Spécifications techniques

Sensibilité : 0,1 ppb
La température d'incubation : 25℃
Temps d'incubation : 30min~15min

Limite de détection :
Urine porcine 0.3ppb
Porc 0.6ppb

Taux de réaction croisée : Clenbuterol 100%, Cimaterol <4>

Taux de récupération :
Urine porcine, porc 90%±30%

 

3. Composants

 

1	Bandes micro-bien	12 bandes avec 8 démontables puits pièce
2	solution étalon 6× (1 ml chacun)	0ppb	0.1ppb
		0.3ppb	0.9ppb
		2.7ppb	8.1ppb
3	Conjugué d'enzymes	7ml	chapeau rouge
4	Solution de fonctionnement d'anticorps	10ml	chapeau bleu
5	Substrat A	7ml	chapeau blanc
6	SubstrateB	7ml	chapeau noir
7	Arrêtez la solution	7ml	chapeau jaune
8	20× a concentré le tampon de lavage	40ml	chapeau blanc
9	échantillon 5× extrayant la solution	50ml	chapeau transparent

 

4. Matériaux requis mais non fournis

1) Équipements : le lecteur de microplate, imprimante, homogénisateur, vortex, oscillateur, centrifugeuse, incubateur, mesurant introduit à la pipette, équilibre (une sensibilité réciproque de 0,01 g)
2) Micropipettors : 20-200µL à canal unique, 100-1000µL, et 30-300µL multicanal ;
3) réactifs : NaOH, HCI.

 

5. Traitement préparatoire d'échantillon

Instructions (les points suivants doivent être traités avant le traitement préparatoire)
1) seulement les astuces jetables peuvent être employées pour les expériences et les astuces doivent être changées une fois utilisées pour absorber différents réactifs ;
2) avant l'expérience, chaque ustensile expérimental doit être propre et devrait re-être nettoyé s'il y a lieu, afin d'éviter la contamination qui interfère les résultats expérimentaux.

Préparation de solution avant traitement préparatoire d'échantillon :
1) 0.2M HCI : dissolvez 17.2mL HCI dans l'eau désionisée à 1L.
2) NaOH de 1M : dissolvez NaOH 4g dans l'eau désionisée à 100 ml.
3) échantillon extrayant la solution : l'échantillon de 1 part 5X extrayant la solution + 4 parts a désionisé l'eau, mélange également.

5,1 urine porcine
Prenez à 20 le µL urine claire, détectez-directement le (si l'urine sont boueuse, doivent filtrer ou centrifugeuse à 4000 r/min pour la minute 10, puis prennent l'urine claire). Magasin à l'environnement gelé si n'employez pas.
Pli de dilution d'échantillon : 1

5,2 porc
1. pesez 2±0.05g a homogénéisé le prélèvement de tissu dans un tube à centrifuger 50ml, ajoutent 3ml 0.2M HCl, secousse pendant 3 mn.
2. Ajoutez alors la solution de NaOH de 600ul 1M et l'échantillon 2.4ml extrayant la solution, la secousse pour 3min, centrifugeuse à 4000 r/min à la température ambiante (℃ 20-25) pendant 10 mn.
3. prenez le liquide de la -couche 20µL pour l'analyse. (Note : s'il y a grosse couche après centrifugeuse, enlevez la grosse couche ou la grosse couche distincte, prennent le liquide clair pour l'analyse)
Pli de dilution d'échantillon : 4

 

6. Procédures d'ELISA

6.1Instructions
1. apportez tous les réactifs et bandes micro-bien à la température ambiante (℃ 20-25) avant emploi ;
2. retour tous les réactifs au ℃ 2-8 juste après l'utilisation ;
3. La reproductibilité de l'analyse d'ELISA, dans une large mesure, dépend de la cohérence du lavage de plat. L'opération correcte du lavage de plat est le point clé dans ELISA les procédures ;
4. Pour l'incubation aux températures constantes, tous les échantillons et réactifs doivent éviter l'exposition à la lumière, et chaque microplate devrait être scellé par la membrane de couverture.

procédures 6.2Operation
1. apportez le kit d'essai à la température ambiante (℃ 20-25) pour au moins la minute 30, notent que chaque réactif doit être secoué également avant emploi ;
2. mettez les bandes micro-bien requises dans des cadres de plat. A rescellé le microplate inutilisé, stocké au ℃ 2-8, non congelé.
3. diluez le tampon du lavage 40ml concentré par 20X à 1h19 avec de l'eau désionisé (tampon de lavage concentré par 20X de 1 part + l'eau désionisée 19 par parts). Ou préparez comme quantité requise.
4. numérotation : nombre les micro-puits selon les échantillons et la solution étalon ; chaque échantillon et solution étalon devraient être exécutés en double ; enregistrez leurs positions.
5. ajoutez 20µL de l'échantillon ou de la solution étalon dans les puits en double distincts, puis ajoutez le conjugué d'enzymes, 50ul/well ; ajoutez alors la solution de fonctionnement d'anticorps, 80µL/well. Mélangez doucement en secouant le plat manuellement, joint le microplate à la membrane de couverture, incubez au ℃ 25 pendant 30 mn.
6. versez liquide hors du microwell, ajoutez 250µL/well du tampon de lavage, lavage pendant 4-5 fois, 15-30s chaque fois, puis sortez et agitez-vous pour sécher avec le papier absorbant (s'il y a les bulles après le battement, les coupent avec les astuces propres).
7. coloration : ajoutez 50µL du substrat A, puis ajoutez 50µL le substrat B dans chaque puits. Mélangez doucement en secouant le plat manuellement, et incubez au ℃ 25 pour le minin 15 le foncé pour la coloration.
8. détermination : ajoutez 50µL de arrêtent la solution dans chaque puits. Mélangez doucement en secouant le plat manuellement. Placez la longueur d'onde du lecteur de microplate à 450nm pour déterminer la valeur d'OD de chaque puits. (Recommandez de lire la valeur d'OD au 450/630nm à double longueur d'onde à moins de la minute 5).

 

7. Jugement de résultat

Il y a deux méthodes pour juger les résultats ; le premier est le jugement approximatif, alors que le deuxième est la détermination quantitative. Note que la valeur d'OD de l'échantillon a une corrélation négative avec la concentration en β-agonistes dans l'échantillon.

7,1 détermination qualitative
La gamme de concentration (ng/mL) a obtenu à partir de comparer la valeur moyenne d'OD de l'échantillon à celle de la solution étalon. Supposer que la valeur d'OD de l'échantillonⅠ est 0,3, et ce du Ⅱ témoin est 1,0, la valeur d'OD des solutions étalons est : 2,243 pour 0ppb, 1,816 pour 0.1ppb, 1,415 pour 0.3ppb, 0,74 pour 0.9ppb, 0,313 pour 2.7ppb, 0,155 pour 8.1ppb, en conséquence la gamme de concentration du Ⅰ témoin est 2,7 à 8.1ppb, et ce du Ⅱ témoin est 0,3 à 0.9ppb.

7,2 détermination quantitative
Les valeurs moyennes des valeurs d'absorbance obtenues pour la valeur moyenne d'OD (b) de l'échantillon et de la solution étalon divisés par la valeur d'OD (B0) de la première solution étalon (0 normes) et plus tard multipliés d'ici 100%, celui est

 

Pourcentage de valeur d'absorbance =	B	×100%
	B0

 

Valeur de moyenne de B-the (doubles puits) OD de l'échantillon ou de la solution étalon
Valeur de la moyenne OD de B0-the des 0 solutions étalons de ng/mL
Dessinez la courbe standard avec les pourcentages d'absorption des solutions étalons et les valeurs de semilogarithm des solutions étalons de β-agonistes (ng/mL) comme y et axe des abscisses, respectivement. Lisez la concentration correspondante de l'échantillon provenant de la courbe standard en incorporant son pourcentage d'absorption dans la courbe standard. La valeur en résultant est plus tard multipliée par le pli de dilution, obtenant finalement la concentration en β-agonistes dans l'échantillon.

 

8. Précautions

la température ambiante 1.The en-dessous du ℃ 25 ou la température des réactifs et des échantillons n'étant pas retourné à la température ambiante (℃ 20-25) mènera à une valeur standard plus basse d'OD.
2.Dryness du microplate dans le procédé de lavage sera accompagné des situations comprenant les courbes standard non linéaires et la reproductibilité indésirable ; Continuez ainsi à la prochaine étape juste après le lavage.
3.Mix également, autrement là sera la reproductibilité indésirable.
la solution de l'arrêt 4.The est la solution acide sulfurique de 2 M, évitent d'entrer en contact avec la peau.
5. N'employez pas le kit dépassant sa date d'échéance. L'utilisation des réactifs dilués ou frelatés des kits mènera aux variations de la sensibilité et des valeurs de détection d'OD. N'échangez pas les réactifs des kits de différents numéros de lot pour employer.
6. mettez le microplate inutilisé dans un sac d'automatique-cachetage pour le resceller. La substance étalon et la couleur sans couleur anciennes est sensible à la lumière, et elles ne peuvent pas être directement exposées ainsi à la lumière.
7. jetez la solution de coloration avec n'importe quelle couleur qui indique la dégénérescence de cette solution. La valeur de détection des 0 solutions étalons (0 ppb) de moins de 0,5 indique sa dégénérescence.
8. La température optima de réaction est le ℃ 25, et les températures trop élevées ou si basses auront comme conséquence les variations de la sensibilité de détection et des valeurs d'OD.

 

9. Date de stockage et d'échéance

Stockage : magasin au ℃ 2-8, non congelé.
Date d'échéance : 12 mois ; la date de la production est sur la boîte.
Remarques : Si l'emballage sous vide des plats de microtitre a la fuite, le plat de microtitre est normal et efficace, n'affectez pas le résultat expérimental. Sentez svp librement pour employer.

 

 

 

 

 

Q1 : Quand sera-t-il embarqué ?
A1 : Nous embarquerons les marchandises pour vous dès que possible dans un délai de 7 jours ouvrables après réception du paiement. (En cas de facteurs externes tels que l'épidémie, la livraison peut être retardée)

 

Q2 : Soutient-il OEM/ODM ?
A2 : Il peut être soutenu, mais la quantité spécifique doit être plus de 100 000 morceaux, qui est commode pour les produits adaptés aux besoins du client.

 

Q3 : Comment votre usine va-t-elle en termes de contrôle de qualité ?
A3 : Nous avons nationalement certifié ISO9001 et ISO13485. Notre processus de fabrication se conforme aux procédures standard pour assurer la qualité du produit optima.

 

Q4 : Comment fournir le service après-vente ?
A4 : Nous fournissons le service après-vente technique en ligne professionnel. Nous pouvons te fournir des conseils faces à face par l'intermédiaire de la vidéo, du téléphone, etc.

 

Q5 : Quelle est la méthode de paiement ?
A5 : Nous recevons le paiement par T/T.

 

Q6 : Comment se transporter ?
A6 : Choisissez la meilleure méthode de expédition pour vous en obtenant des citations de nos beaucoup de transporteurs coopératifs, et également de bateau selon vos conditions.