Metronidazole ELISA Antibody Fast Detection Kit pour le miel 96 Wells/Kit Sensitivity 0,05 Ppb

Metronidazole ELISA Test Kit pour le miel 96 Wells/Kit Sensitivity 0,05 ppb

 

1. Principe

Ce kit d'essai est basé sur l'immunoessai concurrentiel d'enzymes pour la détection de Metronidazole dans l'échantillon. Les antigènes de accouplement sont enduits d'un préenduisage sur les rayures micro-bien. Le Metronidazole dans l'échantillon et les antigènes de accouplement enduits d'un préenduisage sur les rayures micro-bien concurrencent pour anti- les anticorps de Metronidazole. Après que l'addition du conjugué d'enzymes, le substrat de TMB soit ajoutée pour la coloration. La valeur de la densité optique (OD) de l'échantillon a une corrélation négative avec le Metronidazole dans elle. Cette valeur est comparée à la courbe standard et la concentration de Metronidazole est plus tard obtenue.

2. Spécifications techniques

Sensibilité : 0.05ppb
Limite de détection
Miel : au sujet de 0.1ppb
Note : ppb= ng/ml ou ng/g

Taux de réaction croisée :
Metronidazole 100%
Ornidazole 83%
Secnidazole 110%
Le Metronidazole-OH <1> Tinidazole <1> Dimetridazole <1>

Taux de récupération : 90±30%
 

3. Composants

 

1	Bandes micro-bien	12 bandes avec 8 démontables puits pièce
2	solution étalon 6× (1mL chacun)	0 ppb	0,05 ppb
		0,15 ppb	0,45 ppb
		ppb 1,35	ppb 4,05
3	Conjugué d'enzymes	12 ml	chapeau rouge
4	Solution de fonctionnement d'anticorps	7 ml	chapeau bleu
5	Substrat A	7 ml	chapeau blanc
6	SubstrateB	7 ml	chapeau noir
7	Arrêtez la solution	7 ml	chapeau jaune
8	20× a concentré le tampon de lavage	30 ml	chapeau blanc
9	Redissoudre la solution	50 ml	chapeau transparent

 

4. Matériaux requis mais non fournis

1) Équipements : le lecteur de microplate (450nm, 630nm), imprimante, dispositif d'azote-séchage, vortex, dispositif trembleur, centrifugeuse (3000g et ci-dessus), mesurant introduit à la pipette, l'équilibre (une sensibilité réciproque de 0,01 g), incubateur (4℃, 25℃), bain d'eau, minuterie ;
2) Micropipettors : µL 20-200 µL à canal unique, 100-1000, et µl du huit-canal 30~300 ;
3) réactifs (AR) : Na2HPO412H2O▪, NaH2PO4·2H2O, acétate éthylique, hexane, l'eau désionisée.

5. Traitement préparatoire d'échantillon

Instructions
Les points suivants doivent être traités avant le traitement préparatoire du genre d'échantillon :
1) seulement les astuces jetables peuvent être employées pour les expériences et les astuces doivent être changées une fois utilisées pour absorber différents réactifs ;
2) avant l'expérience, chaque équipement expérimental doit être propre et devrait re-être nettoyé s'il y a lieu, afin d'éviter la contamination qui interfère les résultats expérimentaux.

Préparation de solution avant traitement préparatoire d'échantillon :
1) tampon de lavage : 1 part 20× a concentré le tampon de lavage + 19 parts d'eau désionisée.
2) tampon de 0.2M Phosphate : pesez 25.8g Na2HPO412H2O▪, 4.350g NaH2PO4·2H2O, ajoutent 500ml ont désionisé l'eau pour se dissoudre complètement.
 

5,1 préparation témoin
Miel
1) pèsent l'échantillon de miel de 2.0± 0.05g dans le tube à centrifuger 50ml en plastique ;
2) ajoutent le tampon de 2ml 0.2M Phosphate, puis ajoutent l'acétate 8ml éthylique, secouent fortement pour 5min (ou employer le vortex pour 3min) pour établir le contact témoin avec la phase organique complètement ;
3) centrifugeuse à au-dessus de 3000 g à la température ambiante pour 5min ;
4) liquide clair de -couche du transfert 4ml dans le tube à centrifuger 5ml (note : ne prenez pas la phase de l'eau de vers le bas-couche), coup pour sécher sur le bain d'eau 50-60℃ ;
5) ajoutent l'hexane 1ml et 0.5ml redissolvant la solution en conséquence, secouent fortement pour 2min (ou employez le vortex pour 1min) ;
6) centrifugeuse à au-dessus de 3000 g à la température ambiante pour 5min ;
7) la phase organique de -couche d'écart, prennent le liquide de la vers le bas-couche 50ul pour examiner.
Pli de la dilution de l'échantillon : 0,5

6. Procédures d'ELISA

6,1 instructions
1) apportent tous les réactifs et bandes micro-bien à la température ambiante (℃ 20-25) avant emploi ;
2) retour tous les réactifs au ℃ 2-8 juste après l'utilisation ;
3) la reproductibilité de l'analyse d'ELISA, dans une large mesure, dépend de la cohérence du lavage de plat. L'opération correcte du lavage de plat est le point clé dans ELISA les procédures ;
4) pour l'incubation aux températures constantes, tous les échantillons et réactifs doivent éviter l'exposition à la lumière, et chaque microplate devrait être scellé par la membrane de couverture.

6,2 procédures d'opération
1. apportez le kit d'essai à la température ambiante (℃ 20-25) pour au moins la minute 30, notent que chaque réactif doit être secoué pour se mélanger également avant emploi, mettent les bandes micro-bien requises dans des cadres de plat. A rescellé le microplate inutilisé, magasin au ℃ 2-8, non congelé.
2. numérotation : nombre les micro-puits selon les échantillons et la solution étalon ; chaque échantillon et solution étalon devraient être exécutés en double, enregistrent leurs positions.
3. ajoutez le µL 50 de l'échantillon ou de la solution étalon dans les puits en double distincts ; ajoutez alors 50 le µL de la solution de fonctionnement d'anticorps dans chaque puits, mélange doucement en secouant le plat manuellement. Scellez le microplate avec la membrane de couverture, et incubez au ℃ 4 pour 60min dans l'obscurité.
4. versez liquide hors du microwell, ajoutez 250 µL/well de tampon de lavage pour laver le microplate pour 15-30 s, puis versez le tampon de lavage hors du microwell, ajoutez le tampon de lavage pour laver de cette façon pendant 3-4 fois, prenez alors et agitez-vous pour sécher avec le papier absorbant.
5. ajoutez le conjugué des enzymes 100ul (ne mettez pas le microplate à la température ambiante pendant la longue heure après étape de lavage d'éviter la sécheresse de l'avance de microplate à la différence du résultat), mélange doucement en secouant le plat manuellement. Scellez le microplate avec la membrane de couverture, et incubez au ℃ 25 pour 20min dans l'obscurité. Lavage comme étape 4.
6. coloration : ajoutez le mélange 100ul de la solution du substrat A et de la solution du substrat B dans chaque puits (note : la solution du substrat A de mélange et la solution du substrat B au 1:1, emploient le mélange dans 10min, n'emploient pas le métal pour contenir ou remuer, éviter le substrat invalide). Mélangez doucement en secouant le plat manuellement, joint que le microplate avec la membrane de couverture incubent alors au ℃ 25 pour la minute 15 à l'obscurité pour la coloration.
7. détermination : additionnez 50 que le µL du arrêtent la solution dans chaque puits. Mélangez doucement en secouant le plat manuellement. Arrêt avec succès quand couleur de substrat du bleu à jaunir. Recommandez de lire la valeur d'OD au 450/630 nanomètre à double longueur d'onde d'ici 5 minutes.

 

7. Jugement de résultat

Il y a deux méthodes pour juger les résultats : le premier est le jugement approximatif, alors que le deuxième est la détermination quantitative. Note que la valeur d'OD de l'échantillon a une corrélation négative avec la concentration de Metronidazole.

7,1 détermination qualitative
La gamme de concentration (ng/mL) de Metronidazole peut être obtenue à partir de comparer la valeur moyenne d'OD de l'échantillon à celle de la solution étalon. Supposer que la valeur d'OD de l'échantillonⅠ est 0,3, et ce du Ⅱ témoin est 1,0, la valeur d'OD des solutions étalons est : 2,243 pour 0ppb, 1,816 pour 0.05ppb, 1,415 pour 0.15ppb, 0,74 pour 0.45ppb, 0,313 pour 1.35ppb, 0,155 pour 4.05ppb, en conséquence la gamme de concentration du Ⅰ témoin est 1,35 à 4.05ppb, et ce du Ⅱ témoin est 0,05 à 0.45ppb.

7,2 détermination quantitative
Les valeurs moyennes des valeurs d'absorbance est obtenues pour la valeur moyenne d'OD (b) de l'échantillon et de la solution étalon divisés par la valeur d'OD (B0) de la première solution étalon (0 normes) et plus tard multipliés d'ici 100%, c.-à-d.,

 

Pourcentage de valeur d'absorbance =	B	×100%
	B0

 

Valeur de la moyenne OD de B-the de l'échantillon ou de la solution étalon
Valeur de la moyenne OD de B0-the des 0 solutions étalons de ng/mL
Dessinez la courbe standard avec les pourcentages d'absorption de la solution étalon et les valeurs de semilogarithm de la solution étalon de Metronidazole (ng/mL) comme y et axe des abscisses, respectivement. Lisez la concentration correspondante de l'échantillon provenant de la courbe standard en incorporant son pourcentage d'absorption dans la courbe standard. La valeur en résultant est plus tard multipliée par le pli correspondant de dilution, obtenant finalement la concentration de Metronidazole dans l'échantillon.
Utilisant analysant le logiciel professionnel de ce kit sera plus commode pour l'analyse précise et rapide d'un grand nombre d'échantillons. (Svp contactez-nous pour ce logiciel).

8. Précautions

1. La température ambiante en-dessous du ℃ 25 ou la température des réactifs et des échantillons n'étant pas retourné à la température ambiante (℃ 20-25) mènera à une valeur standard plus basse d'OD.
2. la sécheresse du microplate dans le procédé de lavage sera accompagnée des situations comprenant les courbes standard non linéaires et la reproductibilité indésirable ; Continuez ainsi à la prochaine étape juste après le lavage.
3. le mélange également, autrement là sera la reproductibilité indésirable.
4. La solution d'arrêt est la solution acide sulfurique de 2 M, évitent d'entrer en contact avec la peau.
5. N'employez pas le kit dépassant sa date d'échéance. L'utilisation des réactifs dilués ou frelatés des kits mènera aux variations de la sensibilité et des valeurs de détection d'OD. N'échangez pas les réactifs des kits de différents sorts pour employer.
6. mettez le microplate inutilisé dans un sac d'automatique-cachetage pour le resceller. La solution étalon et la couleur sans couleur anciennes est sensible à la lumière, et elles ne peuvent pas être directement exposées ainsi à la lumière.
7. jetez la solution de coloration avec n'importe quelle couleur qui indique la dégénérescence de cette solution. La valeur de détection de la solution étalon 1 (0 ppb) de moins de 0,5 indique sa dégénérescence.

9. Date de stockage et d'échéance

Stockage : magasin au ℃ 2-8, non congelé.
Date d'échéance : 12 mois ; la date de la production est sur la boîte.

 

 

 

 

 

 

Q1 : Quand sera-t-il embarqué ?
A1 : Nous embarquerons les marchandises pour vous dès que possible dans un délai de 7 jours ouvrables après réception du paiement. (En cas de facteurs externes tels que l'épidémie, la livraison peut être retardée)

 

Q2 : Soutient-il OEM/ODM ?
A2 : Il peut être soutenu, mais la quantité spécifique doit être plus de 100 000 morceaux, qui est commode pour les produits adaptés aux besoins du client.

 

Q3 : Comment votre usine va-t-elle en termes de contrôle de qualité ?
A3 : Nous avons nationalement certifié ISO9001 et ISO13485. Notre processus de fabrication se conforme aux procédures standard pour assurer la qualité du produit optima.

 

Q4 : Comment fournir le service après-vente ?
A4 : Nous fournissons le service après-vente technique en ligne professionnel. Nous pouvons te fournir des conseils faces à face par l'intermédiaire de la vidéo, du téléphone, etc.

 

Q5 : Quelle est la méthode de paiement ?
A5 : Nous recevons le paiement par T/T.

 

Q6 : Comment se transporter ?
A6 : Choisissez la meilleure méthode de expédition pour vous en obtenant des citations de nos beaucoup de transporteurs coopératifs, et également de bateau selon vos conditions.