Nitrofuranne AMOZ ELISA Food Safety Rapid Test Kit For Milk Sensitivity 0.03ppb 96Wells/Kit

Nitrofuranne AMOZ ELISA Food Safety Test Kit pour la sensibilité 0.03ppb 96Wells/Kit de lait

 

1. Principe du nitrofuranne AMOZ ELISA Food Safety Test Kit

 

Ce kit de détection est basé sur un immunoessai concurrentiel d'enzymes pour la détection d'AMOZ dans les échantillons. Des antigènes conjugués sont enduits d'un préenduisage sur des bandes de microwell. L'AMOZ dans l'échantillon concurrence de l'antigène conjugué enduit d'un préenduisage sur la bande de microwell pour l'anti-AMOZ anticorps. Après que le conjugué d'enzymes soit ajouté, le substrat de TMB est ajouté pour la souillure. La valeur de la densité optique (OD) d'un échantillon est négativement corrélée avec l'AMOZ dans elle. Cette valeur est comparée à une courbe standard et la concentration d'AMOZ est plus tard obtenue.

 

2. Spécifications techniques

 

Sensibilité : 0.03ppb

La température d'incubation : 25℃

Temps d'incubation : 30min~15min

Tissu de limite de détection, oeuf, miel : 0.1ppb

Taux de réaction croisée

AMOZ 100%

AHD < 0="">

AOZ < 0="">

SEM < 0="">

Taux de récupération

± 25% du tissu 80

± 25% du miel 75

± 25% des oeufs 95

 

3. Composants du nitrofuranne AMOZ ELISA Food Safety Test Kit

 

1	Bandes micro-bien	12 bandes avec 8 démontables puits pièce
2	solution étalon 6× (1 ml chacun)	0ppb	0.03ppb
		0.09ppb	0.27ppb
		0.81ppb	2.43ppb
3	Conjugué d'enzymes	7ml	chapeau rouge
4	Solution de fonctionnement d'anticorps	7ml	chapeau bleu
5	Substrat A	7ml	chapeau blanc
6	SubstrateB	7ml	chapeau noir
7	Arrêtez la solution	7ml	chapeau jaune
8	20× a concentré le tampon de lavage	40ml	chapeau blanc
9	2× a concentré redissoudre la solution	50ml	chapeau transparent
10	2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3)	2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3)	2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3)

 

4. Matériaux requis mais non fournis

 

1) Équipement : lecteur de microplate, imprimante, homogénisateur, dessiccateur d'azote, vortexer, centrifugeuse, tube de mesure, équilibre (0.01g réciproque), incubateur, bain d'eau ;

2) Micropipette : simple canal 20-200µL, 100-1000µL, 30-300µl multicanal ;

3) Réactifs : NaOH, acétate éthylique, n-hexane, HCL (environ 36,5%), K2HPO4 3H2O.

 

5. Traitement préparatoire d'échantillon

 

instruisez

Les points suivants doivent être abordés avant n'importe quel genre de traitement préparatoire d'échantillon :

1) L'expérience peut seulement employer les astuces jetables, et les astuces doivent être remplacées en aspirant différents réactifs ;

2) Avant l'expérience, l'équipement expérimental doit être nettoyé et re-nettoyé s'il y a lieu pour éviter la contamination interférant les résultats expérimentaux.

Préparation de solution avant traitement préparatoire d'échantillon :

1) 0,1 M K2HPO4 : Dissolvez g 11,4 de K2HPO4·3H2O dans l'eau désionisée à 500 ml.

2) 1 M HCl : Dissolvez 8,6 ml de HCL (environ 36,5%) dans l'eau désionisée à 100 ml.

3) NaOH de 1 M : Dissolvez 4 g de NaOH dans l'eau désionisée à 100 ml.

4) 2× dilué a concentré redissoudre la solution avec de l'eau désionisé au 1:1 (1 ml concentré redissolvant la solution + 1 ml d'eau désionisée) pour redissoudre d'échantillon.

 

5,1 préparation témoins

) un tissu, oeuf

1) Pesez 1± 0.05g de l'échantillon homogénéisé, ajoutez 4mL de l'eau distillée, 0.5mL 1 M HCI et 100µL 2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) à chaque tube, secouent correctement pour 2min ;.

2) Incubez at37℃ au-dessus de nuit (heures approx16) ou incubez at56℃ par le bain d'eau (2 heures).

3) Ajoutez 5mL 0.1M K2HPO4, NaOH de 0.4mL 1M et 6mL l'acétate éthylique à chaque tube, secousse pour 30s.

4) Centrifugeuse à 4000r/min ci-dessus à la température ambiante (℃ 20-25) pour 10min (s'il y a d'émulsification ou la couche d'acétate éthylique n'est pas assez pour 3ml, n'incube pas l'échantillon au bain d'eau de 80 ℃ pour 10min et centrifugeuse à plusieurs reprises ; ou augmentez la vitesse et prolongez la période de la centrifugeuse).

5) Transfert 3mL de la couche d'acétate éthylique dans un nouveau tube centrifuge et s'évaporer à sec par l'azote ou avion à 50℃.

6) Dissolvez les résidus secs en n-hexane 2mL, ajoutez 1mL de la solution redissolvante diluée, mélange correctement pendant 30 secondes, centrifugeuse à au-dessus de 4000 r/min à la température ambiante (℃ 20-25) pour la minute 10 ; Enlevez la phase de n-hexane de -couche (s'il y a d'émulsification, après élimination de la phase de n-hexane de -couche, incube l'échantillon au bain d'eau de 70 ℃ pour 10-20min, le centrifuge à plusieurs reprises).

7) Prenez à 50 le µL du inférieur pour l'analyse.

Pli de la dilution de l'échantillon : 2

b) Miel

1) Pesez 2± 0.05g de l'échantillon homogénéisé (miel), ajoutez 4mL de l'eau distillée, 0.5mL 1 M HCI et 100 le µL 2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) à chaque tube, secouent correctement pour 2min ;.

2) Incubez at37℃ au-dessus de nuit (heures approx16) ou incubez at56℃ par le bain d'eau (2 heures).

3) Ajoutez 5mL 0.1M K2HPO4, NaOH de 0.4mL 1M et 6mL l'acétate éthylique à chaque tube, secousse pour 30s.

4) Centrifugeuse à 4000r/min ci-dessus à la température ambiante (20-25℃) pour 10min (s'il y a d'émulsification ou la couche d'acétate éthylique n'est pas assez pour 3ml, n'incube pas l'échantillon au bain d'eau de 80 ℃ pour 10min et centrifugeuse à plusieurs reprises ; ou augmentez la vitesse et prolongez la période de la centrifugeuse).

5) Transfert 3mL de la couche d'acétate éthylique dans un nouveau tube centrifuge et s'évaporer à sec par l'azote ou avion au ℃ 50.

6) Dissolvez les résidus secs en n-hexane 2mL, ajoutez 1mL de la solution redissolvante diluée, mélange correctement pendant 30 secondes, centrifugeuse à au-dessus de 4000r/min à la température ambiante (℃ 20-25) pour la minute 10 ; Enlevez la phase de n-hexane de -couche (s'il y a d'émulsification, après élimination de la phase de n-hexane de -couche, incube l'échantillon au bain d'eau de 70 ℃ pour 10-20min, le centrifuge à plusieurs reprises).

7) Prenez à 50 le µL du inférieur pour l'analyse.

Pli de la dilution de l'échantillon : 1

 

6. Procédures d'ELISA

 

6,1 instructions

1) Apportez tous les réactifs et bandes micro-bien à la température ambiante (℃ 20-25) avant emploi ;

2) Renvoyez tous les réactifs au ℃ 2-8 juste après l'utilisation ;

3) La reproductibilité de l'analyse d'ELISA, dans une large mesure, dépend de la cohérence du lavage de plat. L'opération correcte du lavage de plat est le point clé dans ELISA les procédures ;

4) Pour l'incubation aux températures constantes, tous les échantillons et réactifs doivent éviter l'exposition à la lumière, et chaque microplate devrait être scellé par la membrane de couverture.

6,2 procédures d'opération

1) Apportez le kit d'essai à la température ambiante (℃ 20-25) pour au moins la minute 30, notez que chaque réactif doit être secoué pour se mélanger également avant emploi, mettez les bandes micro-bien requises dans des cadres de plat. A rescellé le microplate inutilisé, magasin au ℃ 2-8, non congelé.

2) Préparation de solution : 40mL dilué du tampon de lavage concentré 20 par × avec de l'eau désionisé à 1h19 1 (tampon de lavage concentré par × de 1 partie 20 + 19 parts d'eau désionisée). Ou préparez comme nécessaire.

3) Numérotation : nombre les micro-puits selon les échantillons et la solution étalon ; chaque échantillon et solution étalon devraient être exécutés en double, enregistrent leurs positions.

4) Ajoutez 50µL de l'échantillon ou de la solution étalon dans les puits en double distincts ; ajoutez le conjugué puis 50µL de la solution de fonctionnement d'anticorps dans chaque puits, mélange des enzymes 50ul doucement en secouant le plat manuellement. Scellez le microplate avec la membrane de couverture, andincubate 25 au ℃ for30min.

5) Versez le liquide hors du microwell, aileron pour sécher sur le papier absorbant, ajoutez 250 µL/well de tampon de lavage pour laver le microplate pendant des 15-30s, puis sortez et agitez-vous pour sécher avec le papier absorbant, répétez 4-5 fois. (S'il y a les bulles après le battement, les a coupées avec les astuces propres).

6) Coloration : ajoutez le µL 50 le µL du substrat A et puis 50 du substrat B dans chaque puits. Mélangez doucement en secouant le plat manuellement, puis incubez au ℃ 25 pour la minute 15 à l'obscurité pour la coloration.

7) Détermination : ajoutez 50µL de arrêtent la solution dans chaque puits. Mélangez doucement en secouant le plat manuellement. Placez la longueur d'onde du lecteur de microplate à 450nm pour déterminer la valeur d'OD de chaque puits. (Recommandez de lire la valeur d'OD au 450/630nm à double longueur d'onde d'ici 5 minutes).

 

7. Jugement de résultat

 

Il y a deux méthodes pour juger les résultats : le premier est le jugement approximatif, alors que le deuxième est la détermination quantitative. Note que la valeur d'OD de l'échantillon a une corrélation négative avec la concentration d'AMOZ.

7,1 détermination qualitative

La gamme de concentration (ng/mL) d'AMOZ peut être obtenue à partir de comparer la valeur moyenne d'OD de l'échantillon à celle de la solution étalon. Supposer que la valeur d'OD de l'échantillonⅠ est 0,3, et ce du Ⅱ témoin est 1,0, la valeur d'OD des solutions étalons est : 2,243 pour 0ppb, 1,816 pour 0.03ppb, 1,415 pour 0.09ppb, 0,74 pour 0.27ppb, 0,313 pour 0.81ppb, 0,155 pour 2.43ppb, en conséquence la gamme de concentration du Ⅰ témoin est 0,81 à 2.43ppb, et ce du Ⅱ témoin est 0,09 à 0.27ppb.

7,2 détermination quantitative

Les valeurs moyennes des valeurs d'absorbance est obtenues pour la valeur moyenne d'OD (b) de l'échantillon et de la solution étalon divisés par la valeur d'OD (B0) de la première solution étalon (0 normes) et plus tard multipliés d'ici 100%, c.-à-d.,

Pourcentage de valeur d'absorbance =	B	×100%
	B0

Valeur de la moyenne OD de B-the de l'échantillon ou de la solution étalon

Valeur de la moyenne OD de B0-the des 0 solutions étalons de ng/mL

Dessinez la courbe standard avec les pourcentages d'absorption de la solution étalon et les valeurs de semilogarithm de la solution étalon d'AMOZ (ng/mL) comme y et axe des abscisses, respectivement. Lisez la concentration correspondante de l'échantillon provenant de la courbe standard en incorporant son pourcentage d'absorption dans la courbe standard. La valeur en résultant est plus tard multipliée par le pli correspondant de dilution, obtenant finalement la concentration d'AMOZ dans l'échantillon.

 

8. Précautions

 

1) Si la température ambiante est inférieure que 25℃ ou la température de réactif et l'échantillon ne reviennent pas à la température ambiante (20-25℃), la valeur standard d'OD chutera.

2) Pendant le procédé de lavage, le séchage du microplate sera accompagné de la non-linéarité de la courbe standard, et la reproductibilité n'est pas idéale ; , procédez donc à la prochaine étape juste après le lavage.

3) Mélangez bien, autrement la reproductibilité sera pauvre.

4) Arrêtez la solution est solution acide sulfurique de 2 M, évitent le contact cutané.

5) N'employez pas le kit au delà de la durée de conservation. L'utilisation des réactifs dilués ou frelatés du kit peut avoir comme conséquence les variations des valeurs de sensibilité et de détection OD. Ne remplacez pas les réactifs dans différentes séries de kits.

6) Rescellez les microplates inutilisés dans les sacs zip-lock. Les solutions étalons et les coupleurs sans couleur sont sensibles à la lumière et ne peuvent pas être directement exposés pour s'allumer.

7) Jetez n'importe quelle solution de coloration dont la couleur indique que la solution a dégradé. Une valeur de détection de moins de 0,5 pour la solution étalon 1 (0 ppb) indique la dégradation.

8) La température optimale de réaction est 25℃, et la sensibilité de détection et la valeur d'OD changeront si la température est trop haute ou si basse.

 

9. Date de stockage et d'échéance

 

Stockage : magasin au ℃ 2-8, non congelé.

Date d'échéance : 12 mois ; la date de la production est sur la boîte.

Note : Si l'emballage sous vide du microplate a la fuite, il est encore valide pour employer, n'affectent pas le résultat d'essai, soit de détendre pour employer.

 

 

Q1 : Quand sera-t-il embarqué ?
A1 : Nous embarquerons les marchandises pour vous dès que possible dans un délai de 7 jours ouvrables après réception du paiement. (En cas de facteurs externes tels que l'épidémie, la livraison peut être retardée)

 

Q2 : Soutient-il OEM/ODM ?
A2 : Il peut être soutenu, mais la quantité spécifique doit être plus de 100 000 morceaux, qui est commode pour les produits adaptés aux besoins du client.

 

Q3 : Comment votre usine va-t-elle en termes de contrôle de qualité ?
A3 : Nous avons nationalement certifié ISO9001 et ISO13485. Notre processus de fabrication se conforme aux procédures standard pour assurer la qualité du produit optima.

 

Q4 : Comment fournir le service après-vente ?
A4 : Nous fournissons le service après-vente technique en ligne professionnel. Nous pouvons te fournir des conseils faces à face par l'intermédiaire de la vidéo, du téléphone, etc.

 

Q5 : Quelle est la méthode de paiement ?
A5 : Nous recevons le paiement par T/T.

 

Q6 : Comment se transporter ?
A6 : Choisissez la meilleure méthode de expédition pour vous en obtenant des citations de nos beaucoup de transporteurs coopératifs, et également de bateau selon vos conditions.