Essai porcin Kit Antibody ELISA Diagnostic 192 Wells/kit GMP de grippe de porcs de PRV Pseudorabies gigaoctet

Kit de test ELISA d'anticorps gB contre la pseudorage porcine 192 puits/Kit GMP

 

1. Utilisation

Le kit de test ELISA d'anticorps contre la pseudorage porcine GreenSpring® (PRV) est utilisé pour la détection des anticorps gB contre la pseudorage porcine dans le sérum porcin ;évaluation des conditions d'immunité contre la Pseudorage porcine en élevage porcin et investigation de l'épidémiologie de la Pseudorage porcine.Bien que le résultat ne puisse pas distinguer les anticorps immuns et les anticorps infectieux, pour confirmer qu'il s'agit d'un anticorps par vaccin ou d'une infection par un virus sauvage, il faut combiner les données cliniques, le statut immunitaire et d'autres méthodes de diagnostic.

 

2. Principe

Le kit de test ELISA d'anticorps gB de la pseudorage porcine GreenSpring® (PRV) est fabriqué à partir de la plaque de microtitration revêtue d'antigène (revêtue d'antigène PRV) et d'autres réactifs.Il applique le principe ELISA en phase solide au PRV-Ab dans le sérum, puis ajoute un conjugué enzymatique pour se lier spécifiquement au complexe antigène enrobé + PRV-Ab + anticorps anti-porc-IgG marqué par une enzyme sur la microplaque.Avec le substrat TMB, il va générer une quantité de couleur.La profondeur de couleur est relative au contenu du PRV-Ac, lorsque la valeur de couleur est supérieure à la valeur seuil, les porcs sont bien vaccinés ou il existe des infectés naturels.

 

3. Les composants du kit

 

1	Microplaque recouverte d'antigène PRV-gB	96T X 2
2	Conjugué enzymatique	22 ml	couvercle jaune
3	Exemple de solution de diluant	50ml	couvercle transparent
4	PRV-IgG Sérum de contrôle négatif	1,5 ml	couvercle vert
5	PRV-IgG Sérum de contrôle positif	1,5 ml	couvercle rouge
6	Substrat	12ml X2	couvercle orange
sept	Solution d'arrêt	12 ml	couvercle bleu
8	Tampon de lavage concentré 20×	50ml	couvercle blanc
9	Feuille adhésive	6 morceaux
dix	Instruction	1 pièce

 

4. Matériel requis mais non fourni

1) Lecteur de microplaques (longueur d'onde double : 450/630 nm).
2) Micropipette précise (canal unique 1-100ul, 0,5-10ul, multicanal 30-300ul)
3) Boîte à température constante ou boîte à bain-marie.
4) Oscillateur.
5) Laveuse de microplaques.
6) Embouts jetables (10ul, 200ul)
7) Eau déminéralisée

 

5. Exigence d'échantillon

1) Les échantillons sont du sérum porcin, qui doit être prélevé sans bactéries.Le temps de stockage doit être inférieur à 1 semaine à 2-8 ℃, si à long terme, il doit être conservé à -20 ℃.
2) Éviter d'utiliser les échantillons présentant une hémolyse sévère, un précipité, contaminé par des bactéries ou une suspension protéique.
3) L'EDTA, l'héparine sodique et les autres anticoagulants n'affecteront pas les résultats.

 

6. Préparation

1) Amener les réactifs ELISA à température ambiante (20-25 ℃) pendant 30 min pour obtenir les meilleurs résultats.
2) Échantillon dilué : Diluer l'échantillon avec le diluant d'échantillon à 40 fois. (Il y aura un changement de couleur après l'ajout de la solution), l'échantillon dilué doit être mélangé uniformément pour obtenir de meilleurs résultats.
3) Préparation de la solution de lavage : Diluer 20 fois le tampon de lavage concentré avec de l'eau déminéralisée.

 

7. Procédure

1) Retirez les plaques enduites (peuvent être détachées) et notez la position de l'échantillon sur une feuille de travail.Placer 2 puits pour le sérum de contrôle négatif, ajouter le sérum de contrôle négatif non dilué, 2 puits pour le sérum de contrôle positif, ajouter le sérum de contrôle positif non dilué, 100 μL/puits.D'autres sont des puits d'échantillon, ajoutez l'échantillon dilué, 100 μl chacun (le test à puits unique et à double puits est OK).
2) Mélangez doucement, couvrez et incubez à 37℃ pendant 30 min.
3) Retirez le film adhésif.Versez le liquide hors des puits, ajoutez complètement le tampon de lavage dilué dans chaque puits, versez directement, pas besoin d'être statique.Répéter 3 fois, en tapotant en dernier pour sécher sur du papier absorbant.
4) Ajouter 100 μl de conjugué enzymatique dans chaque puits.
5) Couvrir la plaque avec une nouvelle feuille adhésive. Incuber à 37 ℃ pendant 30 min.
6) Répétez l'étape 3 (lavage).
7) Ajoutez 100 ul de substrat dans chaque puits, mélangez correctement, incubez pendant 10 min à 37 ℃ dans l'obscurité avec une nouvelle feuille adhésive.
8) Ajouter 50 μL de solution d'arrêt dans chaque puits, mélanger doucement et déterminer le résultat.
9) Mesurez la valeur OD de chaque puits avec un photomètre à une longueur d'onde double de 450 nm/630 nm.

 

8. Résultats

Pour que le test soit valide, la valeur de DO moyenne des puits de contrôle positif doit être supérieure ou égale à 0,6 et la valeur de DO moyenne des puits de contrôle négatif est inférieure à 0,1.Sinon, le test n'est pas valide, il faut le tester à nouveau.
Le résultat est jugé par la valeur S/P,
S/P=(échantillon OD450/630- NCx(—))/( PCx(—)- NCx(—)), NCx(—) signifie la valeur moyenne OD450/630 du contrôle négatif, PCx(—) signifie la valeur moyenne OD450 du contrôle positif /630 valeur
Si S/P≥0,2, il est positif ;inférieur à 0,2, il est négatif.

 

9. Interprétation du résultat

1. Hémolyse sévère, la séparation des protéines fibreuses dans le sérum n'est pas suffisante, contenant des érythrocytes, un précipité, un échantillon contenant des bactéries peut conduire à un faux positif.
2. Des résultats négatifs peuvent survenir sur des porcs individuels après les vaccins en raison de différences individuelles ou de la durée immunitaire.
3. Résultats positifs du diagnostic sérologique et de l'enquête épidémiologique porcine à combiner avec d'autres méthodes et données cliniques.

 

10. Performances du produit

1. Spécificité : utilisez ce kit pour détecter le sérum de référence, le taux de conformité atteint 100 %.
2. Sensibilité : peut atteindre max 1:5120.
3. Précision : CV(%) pas plus grand que 8 %.
4. Stabilité : Stocker à 2℃～8℃ pendant 12 mois ou stocker à 37℃ pendant 3 jours, le résultat peut atteindre les 3 normes ci-dessus.

 

11. Précautions et avertissements pour les utilisateurs

1. Ce kit de test est destiné à la recherche uniquement.n.
2. Ne pas utiliser de réactifs périmés, ne pas mélanger des réactifs de lots différents.
3. Lisez attentivement le manuel avant utilisation.
4. Les déchets d'expérience doivent être traités avec une stérilisation à la vapeur à haute pression à 121 ℃ pendant 30 minutes, ou traités avec un désinfectant à l'hypochlorite de sodium à 5,0 g/L pendant 30 minutes, puis jetés.
5. La plaque MicroWell retirée de l'environnement réfrigéré doit être équilibrée en humidité pour sécher à température ambiante, puis peut être ouverte.Remettez la plaque MicroWell inutilisée dans un sac en aluminium sec et scellée à 4 ℃.Le réactif liquide non utilisé doit recouvrir les bouchons, stocker à 2-8 ℃ dans l'obscurité avec les autres composants du groupe.
6. Si le tampon de lavage concentré 20 × apparaît cristal, c'est normal, mis à 37 ℃ jusqu'à ce qu'il soit dissous.
7. Doit utiliser Micropipettor pour ajouter des échantillons et des réactifs, et souvent prouver son exactitude.
8. Lors de l'ajout du tampon de lavage, celui-ci doit être plein mais pas de débordement, éviter l'apparition d'enzyme libre à l'embouchure du puits ou la pollution croisée entre les puits.
9. La solution d'arrêt est corrosive, utilisez une grande quantité d'eau pour laver immédiatement lorsque vous touchez la peau ou les vêtements.

 

Spécifications : 96 puits × 2.
Date de péremption : 12 mois.
Stockage : stocker à 2 ~ 8 ℃, dans l'obscurité.
Date de production : sur l'emballage extérieur du kit de test.

 

 

Épidémiologie du virus de la pseudorage porcine

Le virus de la pseudorage est largement répandu dans le monde.La pseudorage est naturellement présente chez les porcs, les bovins, les moutons, les chiens et les chats.En outre, une variété d'animaux sauvages et de carnivores sont également sensibles.Le vison et le furet peuvent également provoquer des épidémies de pseudorage en se nourrissant d'abats de porc contenant le virus de la pseudorage.Parmi les animaux de laboratoire, les lapins sont les plus sensibles, et les souris, les rats et les cobayes peuvent également être infectés.Il existe peu de rapports sur l'infection humaine par le virus de la pseudorage, et aucun d'entre eux n'est basé sur l'isolement du virus.
Les porcs sont l'hôte de stockage du virus de la pseudorage, et les porcs malades, les porcs infectés et les souris infectées sont des sources importantes d'infection de la maladie.De nombreux chercheurs pensent que l'infection d'autres animaux est liée au contact avec des porcs et des souris.
Dans les élevages porcins, le virus de la pseudorage se transmet principalement aux porcs sains par l'élimination des porcs infectés.De plus, le personnel et le matériel contaminés par le virus de la pseudorage jouent un rôle important dans la transmission.La transmission aérienne est le principal moyen de propagation du virus de la pseudorage, mais on ne sait pas jusqu'où il peut se propager.On a également constaté que le bétail qui paissait autour des élevages de porcs où la pseudorage se produit à proximité peut également tomber malade.Dans ce cas, la transmission aérienne est la seule voie possible.Chez les porcs, le virus se transmet principalement par les sécrétions nasales.De plus, le lait et le sperme sont également des voies de transmission possibles.
Après avoir été infectés par le virus de la pseudorage, tous les animaux sauf les porcs sont morts.
La pseudorage survient de façon saisonnière, principalement pendant les saisons froides, mais aussi pendant les autres saisons.

 

 

 

 

 

 

Q1 : Combien de temps vous faudra-t-il pour expédier ?
A1 : généralement expédié sous 7 jours ouvrables.

 

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conseils personnalisés par téléphone, vidéo et autres formulaires.

 

Q5 : Quelle est votre quantité minimum de commande ?
A5 : 1Kit.

 

Q6 : Quelle est la méthode d'expédition ?
A6: Il peut être expédié par exprès (FEDEX, UPS, DHL, EMS, etc.) ou par voie aérienne et terrestre. Veuillez confirmer avec nous avant de passer une commande.