Anticorps ELISA Test Kit One Step 192 Wells/kits rapides de virus de la grippe porcine

Kit de test ELISA d'anticorps contre le virus de la grippe porcine 96 * 2 puits / kit ISO9001

1. Principe

Le virus de la grippe, appelé virus de la grippe, peut être divisé en trois types : A, B et C. Parmi eux, le virus de la grippe A est divisé en plusieurs sous-types selon différents antigènes de l'hémagglutinine H et de la neuraminidase N.Les virus de la grippe A sont actuellement connus pour infecter une variété d'animaux, y compris les oiseaux, les humains, les porcs, les chevaux, les chiens, les baleines, etc.
Ce kit utilise la méthode ELISA bloquante, pour détecter l'anticorps du virus de la grippe A dans le sérum de plusieurs animaux comme les porcs, les oiseaux, le chien, le cheval, etc. Lors du test, ajoutez un échantillon de sérum dilué, après incubation, s'il y a un anticorps spécifique du virus de la grippe A, il combiner avec l'antigène pré-enrobé, jeter l'anticorps non combiné et les autres composants avec lavage ;ajouter ensuite l'anticorps monoclonal anti-virus de la grippe A marqué par une enzyme, l'anticorps dans l'échantillon bloque la combinaison de l'anticorps monoclonal et de l'antigène pré-enrobé ;jeter le conjugué enzymatique non combiné avec lavage ;Ajouter le substrat TMB dans les micro-puits, le signal bleu par catalyse enzymatique est en proportion inverse de la teneur en anticorps dans l'échantillon, utiliser le lecteur ELISA à une longueur d'onde de 450 nm pour mesurer la valeur d'absorbance A dans les puits de réaction après avoir ajouté la solution d'arrêt pour arrêter la réaction.

2. Réactifs et contenu

3. Matériel nécessaire non fourni

1) Micropipette : 10ul-100ul, 100ul-1000ul.
2) Pointes de pipettes jetables.
3) Diplômé : 500 ml.
4) Lecteur de microplaques : 96 puits avec une longueur d'onde de 450/630 nm.
5) Eau distillée ou eau déminéralisée.
6) laveur de bouteilles ou laveur de microplaques

4. Préparation des échantillons

Prenez du sang total animal, obtenez du sérum en utilisant une méthode régulière, le sérum doit être brillant et sans hémolyse.

5. Préparation du tampon de lavage

Remettez le tampon de lavage concentré 10X à température ambiante avant utilisation, s'il y a des cristaux de sel, secouez-le pour le dissoudre, puis diluez-le 10 fois avec de l'eau distillée ou de l'eau déminéralisée.Le tampon de lavage dilué peut être stocké à 4℃ pendant environ 1 semaine.

6. Remarques

1) Remettre tous les réactifs à température ambiante avant utilisation, mettre les réactifs à température ambiante pendant au moins 1 heure.Secouez-le uniformément avant utilisation et conservez-le à 2-8 ℃ après utilisation.
2) Ne mélangez pas les réactifs d'utilisation de différents kits et de différents numéros de lot, évitez que les réactifs ne soient pollués lors de l'utilisation.
3) Le substrat et la solution d'arrêt peuvent irriter la peau et les yeux, soyez prudent lors de l'utilisation.
4) N'exposez pas le substrat à une forte lumière et évitez tout contact avec l'oxydant.
5) Les plaques recouvertes d'antigène doivent être scellées et étanches à l'humidité.Remettez la plaque Micro-Well inutilisée dans un sac en aluminium sec et scellée à 2-8 ℃.
6) Tous les déchets doivent être bien traités pour éviter la pollution avant d'être jetés.
7) Le strict respect des instructions d'utilisation peut obtenir les meilleurs résultats.L'opération de pipetage, la synchronisation et le lavage de l'ensemble du processus doivent être précis.
8) Les plaques enduites d'antigène sont jetables, ne répétez pas l'utilisation.

7. Procédure d'essai

1) Prenez la plaque recouverte d'antigène (la plaque peut être ouverte et utilisée plusieurs fois en fonction de la quantité d'échantillon à chaque fois), pour chaque test, placez 1 puits pour le contrôle positif et 2 puits pour le contrôle négatif, le contrôle positif et le contrôle négatif ne besoin de diluer, prendre 100ul directement et ajouter dans son puits ;
2) Ajouter le diluant d'échantillon aux puits de réaction, 60 ul/puits, puis ajouter l'échantillon de sérum aux puits de réaction, 40 ul/puits, souffler et mélanger uniformément (ne pas mélanger les embouts d'utilisation)
3) Couvrez-le avec une feuille adhésive, incubez à 37 ℃ pendant 60 minutes ;
4) Ouvrez la feuille adhésive, jetez le liquide du puits, ajoutez du tampon de lavage dilué dans chaque puits, 250 ul/puits, puis jetez le liquide, répétez l'étape ci-dessus 6 fois, enfin rabattez pour sécher avec le papier absorbant ;
5) Ajouter le conjugué enzymatique 100 ul/puits, le recouvrir d'une feuille adhésive, incuber à 37 ℃ pendant 60 minutes ;
6) Ouvrez la feuille adhésive, jetez le liquide du puits, lavez 6 fois comme à l'étape 4), n'oubliez pas de sécher enfin le rabat avec le papier absorbant ;
7) Ajoutez le substrat, 100 ul/puits, mélangez-le uniformément puis recouvrez-le d'une feuille adhésive, incubez à 37 ℃ dans l'obscurité pendant 10 minutes ;
8) Ajouter la solution d'arrêt 50ul/puits pour arrêter la réaction, mesurer le résultat en 10 minutes.

8. Jugement des résultats

Lire la valeur OD avec ELISA Reader à 450 nm (630 nm comme référence).
Pour que le test soit valide :
Contrôle négatif (N) Valeur DO > 0,4 ​​;
Méthode de calcul :
Valeur OD de l'échantillon/valeur OD moyenne du contrôle négatif = valeur S/N
Interprétation des résultats
Valeur S/B ≥ 0,4 : Négatif ;
Valeur S/N < 0,4 : Positif.

9. Stockage et date d'expiration

Conserver à 2 ~ 8 ℃ dans l'obscurité, non congelé, date de péremption : 12 mois.

Introduction au virus de la grippe porcine

Le virus de la grippe porcine (virus de la grippe porcine) est un orthomyxovirus qui peut provoquer une grippe endémique chez les porcs.Le 30 avril 2009, l'Organisation mondiale de la santé a renommé le nouveau virus mortel précédemment connu sous le nom de grippe porcine H1N1 influenza A. La grippe porcine est une maladie infectieuse respiratoire hautement contagieuse des porcs.Elle se caractérise par une apparition rapide, une fièvre soudaine et d'autres symptômes du rhume.La récupération est aussi rapide que l'événement.La grippe porcine est causée par un virus de la grippe, qui appartient au même genre que le virus de la grippe qui infecte les êtres humains.Le virus de la maladie a les caractéristiques de la co-infection des humains et des animaux.L'apparition de la grippe porcine dans les troupeaux de porcs est généralement liée à l'introduction de nouveaux troupeaux de porcs dans les élevages porcins.

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