Essai rapide Kit For Feed Grain 96 Wells/Kit Sensitivity de l'ochratoxine A de mycotoxine 0,1 Ppb

Ochratoxine ELISA Test Kit pour des céréales fourragères 96 Wells/Kit Sensitivity 0,1 ppb

1. Principe et utilisation

L'ochratoxine est un métabolite secondaire produit par certaines espèces du genre aspergille et penicillium. Parmi eux, l'ochratoxine A est le plus largement distribué en nature et a la toxicité la plus forte, et a le plus grand impact sur des humains, animaux et végétaux.
Le kit emploie ELISA concurrentiel indirect pour détecter l'ochratoxine (ochratoxines A, OTA) dans les céréales et des échantillons d'alimentation tels que des nouilles de riz, des arachides, et le soja. Le kit se compose du plat d'antigène et le conjugué enduit d'un préenduisage d'enzymes, les anticorps, les normes et d'autres réactifs de soutien. Pendant l'essai, la norme ou la solution témoin est ajoutée, l'ochratoxine dans l'échantillon et l'antigène enduit d'un préenduisage du plat pour concurrencer l'anticorps d'ochratoxine, et après avoir ajouté le conjugué d'enzymes, par l'intermédiaire de la couleur d'exposition de substrat de TMB, les valeurs d'absorbance d'échantillon de l'ochratoxine a une corrélation négative avec son contenu, comparé à la courbe standard et alors multiplié par la correspondance le facteur de dilution, peut dessiner le contenu d'ochratoxine dans les échantillons.

2. Spécifications techniques

Sensibilité : 0.1ppb (ng/ml)

Incubation : 37℃, 30min~30min~15min

Limite de détection :
Grain 1ppb
Alimentation 2ppb

Taux de réaction croisée
Ochratoxine A 100%

Taux de récupération :
Grain, alimentation 85±15%

3. Composants

4. Matériaux requis mais non fournis

1) Équipement : Lecteur d'ELISA (450nm/630nm), imprimante, vortex (dispositif trembleur facultatif), centrifugeuse, équilibre : 0.01g quantité sensible, pipettes graduées, homogénisateur ;
2) micropipettes : 20ml à canal unique | 200ml, 100ml | 1000ml, 300ml multicanal.
3) réactifs : Méthanol, ₃ de NaHCO, l'eau désionisée.

5. Traitement préparatoire d'échantillon

5,1 préparation de solution avant traitement préparatoire d'échantillon :
1) 70%Methanol
7 parts de méthanol + 3 parts de l'eau désionisée ;
2) solution de ₃ de 0.1M NaHCO
Pesez le ₃ de 4.2g NaHCO, ajoutez l'eau désionisée pour se dissoudre à 500ml ;
3) tampon de lavage
1 part de 20X a concentré le tampon de lavage et se dissout avec 19 parts de l'eau désionisée pour obtenir le tampon de lavage prêt à employer.

5,2 ofGrain de préparation (riz, maïs, millet etc.)
1) pèsent l'échantillon 2g homogène dans un tube à centrifuger 50ml, ajoutent le méthanol de 10ml 70%, la secousse pour 5min, centrifugeuse à 4000 r/min à la température ambiante pour 10min ;
2) prennent le liquide clair de la -couche 1ml, ajoutent la solution de ₃ de 1ml 0.1M NaHCO, secouent à également ;
3) prennent le liquide 50ul pour examiner
Facteur de dilution : Limite de la détection 10 : 1ppb

5,3 préparation d'alimentation
1) pèsent l'échantillon 2g homogène dans un tube à centrifuger 50ml, ajoutent le méthanol de 20ml 70%, la secousse pour 5min, centrifugeuse à 4000 r/min à la température ambiante pour 10min ;
2) prennent le liquide clair de la -couche 1ml, ajoutent la solution de ₃ de 1ml 0.1M NaHCO, secouent à également ;
3) prennent le liquide 50ul pour examiner
Facteur de dilution : Limite de la détection 20 : 2ppb

6. Procédures d'ELISA

1) apportent le kit d'essai à la température ambiante (℃ 20-25) pour au moins la minute 30, le tampon de lavage concentré par 20X peut avoir la cristallisation quand magasin dans le froid, le besoin de retourner à la température ambiante pour se dissoudre complètement ; notez que chaque réactif doit être secoué également avant emploi ; Mettez les bandes micro-bien requises dans des cadres de plat. Rescellez le microplate inutilisé, magasin au ℃ 2-8, non congelé.
2) numérotation : nombre les micro-puits selon les échantillons et la solution étalon ; chaque échantillon et solution étalon devraient être exécutés en double ; enregistrez leurs positions.
3) ajoutent la norme/échantillon : Ajoutez le µL 50 de l'échantillon ou la solution étalon dans les puits en double distincts, puis ajoutez la solution de fonctionnement d'anticorps, 50µL/well. Mélangez doucement en secouant le plat manuellement, joint le microplate à la membrane de couverture, incubez à 37℃ pour la minute 30 dans l'obscurité.
4) microplate de lavage : Ouvrez soigneusement le membrance de couverture, versent le liquide hors du microwell ; ajoutez 350 µL/well de tampon de lavage, lavez entièrement pendant 5 fois, 30s chaque fois, puis sortez et agitez-vous pour sécher avec le papier absorbant. (Utilisez la lance inutilisée pour percer la bulle après sec)
5) ajoutent le conjugué d'enzymes : ajoutez le conjugué d'enzymes, 100 µL/well. Mélangez doucement en secouant le plat manuellement, joint le microplate à la membrane de couverture, incubez à la minute de 37℃ for30 dans l'obscurité.
Lavage comme étape 4).
6) coloration : ajoutez le µL 50 du substrat A puis le substrat B de 50 µL dans chaque puits. Mélangez doucement en secouant le plat manuellement, andincubate à 37℃ pour le minin 15 le foncé pour la coloration. (Si la couleur bleue est trop légère, le temps de réaction peut être prolongé convenablement)
7) détermination : additionnez 50 que le µL du arrêtent la solution dans chaque puits. Mélangez doucement en secouant le plat manuellement. Placez la longueur d'onde du lecteur de microplate à 450nm pour déterminer la valeur d'OD de chaque puits. (Recommandez de lire la valeur d'OD au 450/630nm à double longueur d'onde à moins de la minute 10).

7. Jugement de résultat

Afin de calculer la concentration des échantillons, une courbe standard devrait être faite. Avant que la courbe standard soit faite, le concept de % d'absorbance devrait être connu.
Calcul de % d'absorbance :

Valeur de la moyenne OD de B-the de l'échantillon ou de la solution étalon.
Valeur de la moyenne OD de B0-the des 0 solutions étalons de ng/mL.
La norme zéro est ainsi rendue égale à 100 % et les valeurs d'absorbance sont citées dans les pourcentages. Les valeurs ont calculé pour les normes sont entrées dans un système des coordonnées sur le papier de graphique semilogarithmic contre la concentration en ochratoxine A [μg/kg]. La concentration en ochratoxine A dans μg/kg (ppb) correspondant à l'absorbance de chaque échantillon peut être lue de la courbe d'étalonnage.
Un logiciel particulier pour l'analyse de résultat d'ELISA facilitera de doubles ou multiples déterminations. Si vous avez besoin, appelez svp pour demander.

8. Précautions

1) la température ambiante en-dessous du ℃ 25 ou la température des réactifs et des échantillons n'étant pas retourné à la température ambiante (℃ 25) mènera à une valeur standard plus basse d'OD.
2) la sécheresse du microplate dans le procédé de lavage sera accompagnée des situations comprenant les courbes standard non linéaires et la reproductibilité indésirable ; continuez ainsi à la prochaine étape juste après le lavage.
3) mélange même avant d'ajouter tous les réactifs.
4) la solution d'arrêt est la solution acide sulfurique de 2 M, évitent d'entrer en contact avec la peau.
5) n'emploient pas le kit dépassant sa date d'échéance. L'utilisation des réactifs dilués ou frelatés des kits mènera aux variations de la sensibilité et des valeurs de détection d'OD. N'échangez pas les réactifs des kits de différents numéros de lot pour employer.
6) stockage : magasin au ℃ 2-8, non congelé. Mettez le microplate inutilisé dans un sac d'automatique-cachetage pour le resceller. La substance étalon et la couleur sans couleur anciennes est sensible à la lumière, et elles ne peuvent pas être directement exposées ainsi à la lumière.
7) jettent la solution de coloration avec n'importe quelle couleur qui indique la dégénérescence de cette solution. La valeur de détection (450/630nm) des 0 solutions étalons (0 ppb) de moins de 0,5 ((A450nm<0>

9. Date de stockage et d'échéance

Stockage : magasin au ℃ 2-8, non congelé.
Date d'échéance : 12 mois ; la date de la production est sur la boîte.

Q1 : Quand sera-t-il embarqué ?
A1 : Nous embarquerons les marchandises pour vous dès que possible dans un délai de 7 jours ouvrables après réception du paiement. (En cas de facteurs externes tels que l'épidémie, la livraison peut être retardée)

Q2 : Soutient-il OEM/ODM ?
A2 : Il peut être soutenu, mais la quantité spécifique doit être plus de 100 000 morceaux, qui est commode pour les produits adaptés aux besoins du client.

Q3 : Comment votre usine va-t-elle en termes de contrôle de qualité ?
A3 : Nous avons nationalement certifié ISO9001 et ISO13485. Notre processus de fabrication se conforme aux procédures standard pour assurer la qualité du produit optima.

Q4 : Comment fournir le service après-vente ?
A4 : Nous fournissons le service après-vente technique en ligne professionnel. Nous pouvons te fournir des conseils faces à face par l'intermédiaire de la vidéo, du téléphone, etc.

Q5 : Quelle est la méthode de paiement ?
A5 : Nous recevons le paiement par T/T.

Q6 : Comment se transporter ?
A6 : Choisissez la meilleure méthode de expédition pour vous en obtenant des citations de nos beaucoup de transporteurs coopératifs, et également de bateau selon vos conditions.